環(huán)球觀點：流式細胞儀原理是什么？流式細胞儀怎么操作？

來源：京華在線網(wǎng) 時間：2023-06-25 13:58:43

流式細胞儀原理是什么?

流式細胞儀可同時進行多參數(shù)測量，信息主要來自特異性熒光信號及非熒光散射信號。測量是在測量區(qū)進行的，所謂測量區(qū)就是照射激光束和噴出噴孔的液流束垂直相交點。液流中央的單個細胞通過測量區(qū)時，受到激光照射會向立體角為2π的整個空間散射光線，散射光的波長和入射光的波長相同。散射光的強度及其空間分布與細胞的大小、形態(tài)、質(zhì)膜和細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)密切相關(guān)，因為這些生物學(xué)參數(shù)又和細胞對光線的反射、折射等光學(xué)特性有關(guān)。未遭受任何損壞的細胞對光線都具有特征性的散射，因此可利用不同的散射光信號對不經(jīng)染色活細胞進行分析和分選。經(jīng)過固定的和染色處理的細胞由于光學(xué)性質(zhì)的改變，其散射光信號當然不同于活細胞。散射光不僅與作為散射中心的細胞的參數(shù)相關(guān)，還跟散射角、及收集散射光線的立體角等非生物因素有關(guān)。

流式細胞儀怎么操作?

①打開電源，對系統(tǒng)進行預(yù)熱;

②打開氣體閾，調(diào)節(jié)　壓力，獲得適宜的液流速度;開啟光源冷卻系統(tǒng);

③在樣品管中加入去離子水，沖洗液流的噴嘴系統(tǒng);

④利用校準標準樣品，調(diào)整儀器，使在激光功率、光電倍增管電壓、放大器電路增益調(diào)定的基礎(chǔ)上，0和90散射的熒光強度最強，并要求變異系數(shù)為最小;

⑤選定流速、測量細胞數(shù)、測量參數(shù)等，在同樣的工作條件下測量樣品和對照樣品;同時選擇計算機屏上數(shù)據(jù)的顯示方式，從而能直觀掌握測量進程;

⑥樣品測量完畢后，再用去離子水沖洗液流系統(tǒng);

⑦因為實驗數(shù)據(jù)已存入計算機硬盤(有的機器還備有光盤系統(tǒng)，存貯量更大)，因此可關(guān)閉氣體、測量裝置，而單獨使用計算機進行數(shù)據(jù)處理;

⑧將所需結(jié)果打印出來。

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